在操作无菌隔离器时，需要注意以下几个方面：

1、物品的放置：按照经过验证的装载方式放入隔离器中。一般过滤罐会悬挂在隔离器上方的挂钩上，供试品、培养基和缓冲液应放置在有间隙的层架上，物料之间不能紧贴在一起，以避免灭菌死角。

2、手套完整性检查：通过目测或者使用手套检漏仪对隔离器的手套完整性进行检查，确保手套没有破损或泄漏。

3、灭菌过程：按照经过验证的灭菌参数，运行无菌隔离器的灭菌循环。灭菌周期时间根据舱体大小、装载情况以及房间环境，一般在1.5~2.5小时。循环结束后，检查过氧化氢在箱体的残留浓度或读取在线过氧化氢低浓度探头的读数。

4、物品整理：将灭菌后的无菌隔离器中的物料按照操作习惯进行重新调整，以便于戴上隔离器手套后能够拿到所需的物品。

5、微生物取样：在隔离器的操作平面上要放置沉降菌的培养皿。在手套手指、手掌、仪器、包装等表面进行表面微生物取样，待测试完成后传递出进行培养。

6、避免污染：在实验操作过程中，应保证操作手套、操作工具、培养基等实验材料和试剂不会碰到隔离器内部，并且不要高温灼烧，以免污染操作区域。

7、手臂的放置：在进入隔离器前，先进行卫生手消毒，并将手臂放入到手臂套口内。避免将手臂伸入隔离器的超出手臂末端套口的范围内，以免破坏无菌环境和危害健康。

8、门的关闭与打开：在关闭无菌隔离器的门后，必须等待隔离器排气完毕后再打开隔离器，否则可能导致气流逆流而影响无菌性能。

9、清洁与消毒：实验操作完成后，关闭隔离器内部工作面积空气净化设备，并让电机工作一段时间，以确保操作区域内的气流彻底被排出。然后用70%的酒精或其他消毒液清洁隔离器的表面及内部操作区域，特别是粘有试剂、培养基的区域。

10、日常保养：每日使用后，要对无菌隔离器内部进行70%酒精或过氧化氢的消毒，以减少污染。对无菌隔离器的外表面进行清洁，但不得使用腐蚀性或有机溶剂。定期更换隔离器的过滤器，以确保过滤效果。

遵循这些注意事项，可以确保无菌隔离器的无菌性和安全性，同时延长其使用寿命和提高其稳定性。